试验所用的菌株传代次数不得超过 5 代(从jun种保藏中心获得的冷冻干燥jun种为第 0 代),并采用适宜的jun种保藏技术进行保存,食品微生物检测,以---试验菌株的生物学特性。培养基适用性检查的jun种及新鲜菌体培养见表 1。
表 1培养基适用性检查、方法适用性试验、---效力测定用的试验菌培养条件
试验菌株 试验培养基 培养温度 培养时间
1、金黄色putao球菌
胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基
30~35℃
18~24小时
2、铜绿假单胞菌)
胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基
30~35℃
18~24小时
3、大肠埃希菌
胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大
豆胨液体培养基
30~35℃
18~24小时
4、白色nian珠菌
沙氏---琼脂培养基或沙氏葡
萄糖液体培养基
20~25℃
24-48小时
5、黑曲霉
沙氏---琼脂培养基或沙氏葡
萄糖液体培养基
20~25℃5~7天或直到获得丰富的孢子
1.平皿法
平皿法包括倾注法和涂布法。除另有规定外,取规定量供试品,按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和菌数测定,每稀释级每种培养基至少制备2个平板。
培养和计数 除另有规定外,胰酪大豆胨琼脂培养基平板在30~35℃培养3~5天,环境微生物检测,沙氏---琼脂培养基平板在20~25℃培养5~7天,观察菌落生长情况,点计平板上生长的所有菌落数,计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后,计算各稀释级供试液的平均菌落数,按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落数平均值不小于15,则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。
菌数报告规则 需氧菌总数测定宜选取平均菌落数小于300cfu的稀释级、霉菌和酵母菌总数测定宜选取平均菌落数小于100cfu的稀释级,微生物检测,作为菌数报告的依据。取zui高的平均菌落数,计算1g、1ml或10c㎡供试品中所含的微生物数,取两位有效数字报告。
如各稀释级的平板均无菌落生长,或仅zui低稀释级的平板有菌落生长,但平均菌落数小于1 时,以<1 乘以zui低稀释倍数的值报告菌数。
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