3.抗jun活性的去除或灭活
供试液接种后，按下列“微生物回收” 规定的方法进行微生物计数。若试验组菌落数减去供试品对照组菌落数的值小于菌液对照组菌落数值的50%，可采用下述方法消除供试品的---活性。
（1）增加稀释液或培养基体积。
（2）加入适宜的中和剂或灭活剂。
中和剂或灭活剂（表2）可用于消除干扰物的---活性，zui好在稀释液或培养基灭菌前加入。若使用中和剂或灭活剂，试验中应设中和剂或灭活剂对照组，微生物检测方法，即取相应量稀释液替代供试品同试验组操作，以确认其有效性和对微生物---性。中和剂或灭活剂对照组的菌落数与菌液对照组的菌落数的比值应在0.5～2 范围内。
（3）采用薄膜过滤法。
（4）上述几种方法的联合使用。
若没有适宜消除供试品---活性的方法，对特定试验菌回收的失败，表明供试品对该试验菌具有较强抗jun活性，同时也表明供试品不易被该类微生物污染。但是，供试品也可能仅对特定试验菌株具有抑制作用，而对其他菌株没有抑制作用。因此，根据供试品须符合的微生物限度标准和菌数报告规则，在不影响检验结果判断的前提下，应采用能使微生物生长的更高稀释级的供试液进行计数方法适用性试验。若方法适用性试验符合要求，应以该稀释级供试液作为zui低稀释级的供试液进行供试品检查。
黑曲霉菌悬液：操作时关闭空调系统及洁净工作台风机。接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏---琼脂培养基中，23～28℃培养5～7天，环境微生物检测，加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌---溶液，将孢子洗脱，然后，用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌---溶液稀释至 ，用比浊法制成每1ml含孢子数108cfu的孢子悬液。
2.接种和稀释
按下列要求进行供试液的接种和稀释，制备微生物回收试验用供试液。所加菌液的体积应不超过供试液体积的1%。为确认供试品中的微生物能被充分检出，首先应选择zui低稀释级的供试液进行计数方法适用性试验。
（1）试验组 取上述制备好的供试液，微生物检测，加入试验菌液，混匀，使每1ml供试液或每张滤膜所滤过的供试液中含菌量不大于100cfu。
（2）供试品对照组 取制备好的供试液，以稀释液代替菌液同试验组操作。
（3）菌液对照组取 不含中和剂及灭活剂的相应稀释液替代供试液，按试验组操作加入试验菌液并进行微生物回收试验。
若因供试品抗jun活性或溶解性较差的原因导致无法选择zui低稀释级的供试液进行方法适用性试验时，应采用适宜的方法对供试液进行进一步的处理。如果供试品对微生物生长的抑制作用无法以其他方法消除，供试液可经过中和、稀释或薄膜过滤处理后再加入试验菌悬液进行方法适用性试验。
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