纯化水微生物限度检查方法-微生物限度检查方法-世纪久海

接种大肠埃希菌、金黄色球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至胰酪胨大豆肉汤培养基中，30～35℃培养18～24小时；接种白色的新鲜培养物至沙氏---液体培养基中，20～25℃培养24～48小时。上述培养物用0.9%无菌---溶液制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏---琼脂斜面培养基中，人手微生物限度检查方法，20～25℃培养5～7天，加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌---溶液，微生物限度检查方法，将孢子洗脱。然后，采用适宜方法吸出孢子悬液至无菌---溶液制成每1ml含孢子数50～100cfu的孢子悬液。

4.供试品中微生物的回收

    微生物的回收可采用平皿法、薄膜过滤法或mpn法。

   （1）平皿法 平皿法包括倾注法和涂布法。表1中每株试验菌每种培养基至少制备2个平皿，以算术均值作为计数结果。

   倾注法 取照上述“供试液的制备” “接种和稀释”和“抗jun活性的去除或灭活” 制备的供试液1ml，病原微生物限度检查方法，置直径90mm的无菌平皿中，注入15～20ml温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂或沙氏---琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。若使用直径较大的平皿，培养基的用量应相应增加。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。

   涂布法 取15～20ml温度不超过45℃的胰酪大豆胨琼脂或沙氏---琼脂培养基，注入直径90mm的无菌平皿，凝固，制成平板，采用适宜的方法使培养基表面干燥。若使用直径较大的平皿，培养基用量也应相应增加。每一平板表面接种上述照“供试液的制备” “接种和稀释” 和“抗jun活性的去除或灭活”制备的供试液不少于0.1ml。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。