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{微生物检测}微生物分离纯化
含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(pureculture)。在进行junzhong鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。
1、倾注平板法
首先把微生物悬液通过一系列稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40-50℃左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,微生物分析方法验证,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物。
2、涂布平板法
首先把微生物悬液通过适当的稀释,取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上,然后用无菌的玻璃guadao把稀释液均匀地涂布在培养基表面上,经恒温培养便可以得到单个菌落。
3、平板划线法
zui简单的分离微生物的方法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的方法很多,常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、fangshe法、四格法等。当接种环在培养基表面上往后移动时,工作台微生物分析方法验证,接种环上的菌液逐渐稀释,---微生物分析方法验证,后在所划的线---散着单个细胞,经培养,每一个细胞长成一个菌落。
---效力
---剂效力测定用培养基应进行培养基的适用性检查,包括成品培养基、由脱水培养基或按配制的培养基均应检查。
7.2试验所用的菌株传代次数不得超过5代(从保藏中心获得的冷冻干燥为第0代),并采用适宜的保藏技术进行保存,以---试验菌株的生物学特性。
铜绿假单胞菌 (pseudomonas aeruginosa)〔cmcc(b)10 104〕
大肠埃希菌 (escherichia coli) 〔cmcc(b) 44 102〕
金黄色菌 (staphylococcus aureus)〔cmcc(b)26 003〕
白色菌 (candida albicans) 〔cmcc(f) 98 001〕
黑曲霉 (aspergillus niger) 〔cmcc(f)
98 003〕
微生物限度检查法
1105非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法
1106非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法
1107非无菌---微生物限度标准
1105非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法
计数方法
……供试品检查时,应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法,物体微生物分析方法验证,检测的样品量应能---所获得的试验结果能够判---试品是否符合规定。所选方法的适用性须经确认。
提示:后文增加了对于“贵重---、微量包装---”的检验量的更的表述,因注意结合此处的要求。
计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验
……菌液制备……取黑曲霉的新鲜培养物加人适量含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液或……
学习:此处改动同无菌检查法,将“3~5ml”的具体量调整为“适量”,便于根据孢子的量灵活掌握菌液制备方法。
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