云南微生物限度-世纪久海检测技术公司-物体微生物限度

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    2023-5-17

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---效力-培养基


培养基的制备

1.胰酪大豆胨液体培养基

 胰酪胨17.0克

---5.0克

大豆木瓜蛋白酶---物3.0克

磷---二钾2.5克

---(一水合)2.5克

水1000ml

除---外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,调节 ph 值使灭菌后在 25℃的 ph 值为 7.3±0.2,加入---,分装,灭菌。

胰酪大豆胨液体培养基置 20~25℃培养。

2. 胰酪大豆胨琼脂培养基

胰酪胨15.0克

---5.0克

大豆木瓜蛋白酶水解物5.0克

琼脂15.0克

水1000ml

除琼脂外,取上述成分,混合。微温溶解,调节 ph 值使灭菌后在 25℃的 ph 值为 7.3±0.2,加入琼脂,---微生物限度,加热溶化后,表面微生物限度,摇匀,分装,灭菌。

3.沙氏---液体培养基

沙氏---琼脂培养基照微生物限度检查法(附录ⅹⅲ c)制备。




微生物限度检查




计数方法适用性试验中,采用平皿法或薄膜过滤法时,试验组菌落数减去供试品对照组菌落数的值与菌液对照组菌落数的比值应在0.5~2范围内;采用mpn法时,试验组菌数应在菌液对照组菌数的95%置信限内。若各试验菌的回收试验均符合要求,照所用的供试液制备方法及计数方法进行该供试品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数。

   方法适用性确认时,若采用上述方法还存在一株或多株试验菌的回收达不到要求,云南微生物限度,那么选择回收接近要求的方法和试验条件进行供试品的检查。

   供试品检查

   检验量

   检验量即一次试验所用的供试品量(g、ml或c㎡)。

   一般应随机抽取不少于2个zui小包装的供试品,物体微生物限度,混合,取规定量供试品进行检验。

   除另有规定外,一般供试品的检验量为10g或10ml;膜剂为100c㎡;贵重---、微量包装---的检验量可以酌减。检验时,应从2个以上zui小包装单位中抽取供试品,大蜜丸还不得少于4丸,膜剂还不得少于4片。

   供试品的检查

   按计数方法适用性试验确认的计数方法进行供试品中需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的测定。

   胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基用于测定需氧菌总数;沙氏---琼脂培养基用于测定霉菌和酵母菌总数。

   阴性对照试验 以稀释液代替供试液进行阴性对照试验,阴性对照试验应无菌生长,如果阴性对照有菌生长,应进行偏差调査。







4.供试品中微生物的回收

    微生物的回收可采用平皿法、薄膜过滤法或mpn法。

   (1)平皿法 平皿法包括倾注法和涂布法。表1中每株试验菌每种培养基至少制备2个平皿,以算术均值作为计数结果。

   倾注法 取照上述“供试液的制备” “接种和稀释”和“抗jun活性的去除或灭活” 制备的供试液1ml,置直径90mm的无菌平皿中,注入15~20ml温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂或沙氏---琼脂培养基,混匀,凝固,倒置培养。若使用直径较大的平皿,培养基的用量应相应增加。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。

   涂布法 取15~20ml温度不超过45℃的胰酪大豆胨琼脂或沙氏---琼脂培养基,注入直径90mm的无菌平皿,凝固,制成平板,采用适宜的方法使培养基表面干燥。若使用直径较大的平皿,培养基用量也应相应增加。每一平板表面接种上述照“供试液的制备” “接种和稀释” 和“抗jun活性的去除或灭活”制备的供试液不少于0.1ml。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。



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