（3）mpn法 mpn法的精密度和准确度不及薄膜过滤法和平皿计数法，仅在供试品需氧菌总数没有适宜计数方法的情况下使用，本法不适用于霉菌计数。若使用mpn法，按下列步骤进行。
取照上述“供试液的制备”“接种和稀释”和“抗jun活性的去除或灭活”制备的供试液至少3个连续稀释级，每一稀释级取3份1ml分别接种至3管装有9～10ml胰酪大豆胨液体培养基中，同法测定菌液对照组菌数。---时可在培养基中加入表面活性剂、中和剂或灭活剂。
接种管置30～35℃培养3天，逐日观察各管微生物生长情况。如果由于供试品的原因使得结果难以判断，人手---效力，可将该管培养物转种至胰酪大豆胨液体培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基，在相同条件下培养1～2 天，观察是否有微生物生长。根据微生物生长的管数从表3查被测供试品每1g或每1ml中需氧菌总数的可能数。
---微生物限度检查适用剂型：
1.部分---给药制剂 : 、酊剂、中药丸剂、糖浆剂、散剂等。
2.含中药原粉、豆豉、、动物组织等---制剂。
3.鼻用制剂等。
4.洗剂等。
5.灌肠剂等。
---微生物限度检查意义：
1.确定是否污染或其污染程度，控制---的；
2.---用药的有效性和安全性；
3.可作为衡量---生产全过程卫生水平的根据之一。
4.供试品中微生物的回收
微生物的回收可采用平皿法、薄膜过滤法或mpn法。
（1）平皿法 平皿法包括倾注法和涂布法。表1中每株试验菌每种培养基至少制备2个平皿，以算术均值作为计数结果。
倾注法 取照上述“供试液的制备” “接种和稀释”和“抗jun活性的去除或灭活” 制备的供试液1ml，物体---效力，置直径90mm的无菌平皿中，表面---效力，注入15～20ml温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂或沙氏---琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。若使用直径较大的平皿，培养基的用量应相应增加。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。
涂布法 取15～20ml温度不超过45℃的胰酪大豆胨琼脂或沙氏---琼脂培养基，注入直径90mm的无菌平皿，凝固，---效力，制成平板，采用适宜的方法使培养基表面干燥。若使用直径较大的平皿，培养基用量也应相应增加。每一平板表面接种上述照“供试液的制备” “接种和稀释” 和“抗jun活性的去除或灭活”制备的供试液不少于0.1ml。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。
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