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    2020-8-2

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微生物限度检查




   

计数方法适用性试验

   1.供试液制备

   根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时,应均匀加热,且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基,微生物检测,不得超过1 小时。

   常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用,应建立其他适宜的方法。

   (1)水溶性供试品 取供试品,微生物的检测,用ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液,或ph7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液。若需要,调节供试液ph值至6~8。---时,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。

   (2)水不溶性非油脂类供试品 取供试品,用ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液,或ph7.2磷酸盐缓冲液,微生物快速检测,或胰酪大豆胨液体培养基制备成1:10供试液。分散力较差的供试品,可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80,使供试品分散均匀。若需要,调节供试液ph值至6~8。---时,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。

   (3)油脂类供试品 取供试品,加入无菌十四烷酸---酯使溶解,或与zui少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无---性的无菌表面活性剂充分混匀。表面活性剂的温度一般不超过40℃(特殊情况下,zui多不超过45℃),小心混合,若需要可在水浴中进行,然后加入预热的稀释液使成1:10供试液,保温,混合,并在zui短时间内形成乳状液。---时,环境微生物检测,用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。



---效力

铜绿假单胞菌菌悬液:接种铜绿假单胞菌的新鲜培养物至胰酪胨大豆肉汤培养基中,30~35℃培养18~24小时;取上述培养物用0.9%无菌---溶液稀释至  

用比浊法制成每1ml含菌数约为108cfu。

8.2.2金黄色pt球菌菌悬液:接种金黄色pt球菌的新鲜培养物至胰酪胨大豆肉汤培养基,30~35℃培养18~24小时;取上述培养物用0.9%无菌---溶液稀释至             ,用比浊法制成每1ml含菌数约为108cfu。






















计数方法

   计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和可能数法(most-probable-number method,简称mpn法)。mpn 法用于微生物计数时jing确度较差,但对于某些微生物污染量很小的供试品,mpn法可能是更适合的方法。

   供试品检查时,应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法,检测的样品量应能---所获得的试验结果能够判---试品是否符合规定。所选方法的适用性须经确认。

   计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验

   供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。

   供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验,以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。

   若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时,计数方法应重新进行适用性试验。




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